Un studiu publicat în Jurnalul PLOS ONE ar putea ajuta cercetătorii să determine dacă bacteriile din specia Streptococcus pneumoniae, care provoacă meningită – o inflamație a membranelor care înconjoară creierul și măduva spinării – sunt rezistente la antibiotice.

Acest tip de analiză nu se realizează în mod ușor atunci când se utilizează metoda convențională. Bacteriile trebuie izolate dintr-o probă prelevată de la pacient și analizate cât sunt încă în viață, ceea ce este dificil deoarece microorganismele sunt sensibile și de obicei nu supraviețuiesc călătoriei către laborator.

O nouă metodă extrem de fezabilă a fost dezvoltată în Brazilia de către cercetătorii de la Institutul Adolfo Lutz (IAL) din Santo André, laboratorul central de supraveghere epidemiologică din statul São Paulo. În perioada 2014 – 2020, au analizat 873 de mostre de lichid cefalorahidian de la pacienții suspecți de meningită streptococică. Lichidul cefalorahidian este produs de țesutul care învelește ventriculii cerebrali. Aceștia se deplasează în și în jurul creierului și măduvei spinării pentru a le proteja de leziuni și pentru a oferi nutrienți.

Ca parte a rutinei laboratorului, oamenii de știință au analizat probele utilizând PCR în timp real, metoda standard pentru diagnosticarea bolilor infecțioase, inclusiv COVID-19. Tehnica amplifică o genă specifică sau o secvență de genă din microorganismul țintă (dacă este prezentă în probă), astfel încât să poată fi identificată mai ușor. În acest caz, S. pneumoniae (infecția cu pneumococ) a fost detectat în 149 de probe. Apoi au analizat probele, care au fost testate pozitiv pentru pneumococ, pentru a detecta cele trei gene asociate cu rezistența la antibiotice, folosind din nou PCR în timp real, dar de data aceasta cu SYBR Green, un colorant care se leagă de ADN și emite un semnal fluorescent care este captat de echipament.

Pentru a afla ce clase de antibiotice au rezistat bacteriile – penicilină, lincosamide sau macrolide – au folosit tehnica curbei de disociere.

După efectuarea tuturor acestor proceduri, cercetătorii au comparat rezultatele cu cele obținute prin metoda convențională, utilizată pentru analiza rezistenței la antibiotice, în care bacteriile vii sunt observate în contact cu fiecare medicament pentru a vedea dacă sunt capabile să prolifereze. Acest test convențional a fost efectuat pe 25 de probe, singurele care au conținut pneumococi viabili pentru procedură. Rezultatele au fost similare, confirmând potențialul tehnicii noi.

„Am constatat că 51% din probele analizate, pe care IAL le-a primit în perioada 2014 și 2020, au fost sensibile la antibiotice. Acest este un lucru pozitiv, ceea ce înseamnă că acești pacienți trebuie să fi avut un prognostic bun. Pe de altă parte, 17% au fost rezistente la diferite medicamente, ceea ce este foarte periculos pentru că în aceste cazuri tratarea bolii este mai dificilă și trebuie încercate alte clase de antibiotice”, a spus Ivana Campos, cercetătorul principal al studiului.

Mai mult, S. pneumoniae este capabilă să-și schimbe structura genetică pe măsură ce se reproduce, astfel încât noile mutații să prezinte gene asociate cu rezistența la medicamente: „Așadar, am ajuns la concluzia că testul pe care l-am dezvoltat poate fi folosit pentru a studia profilul de rezistență al pneumococului, chiar și în absența tulpinilor izolate”, concluzionează Campos.

 

Sursă material: www.eurekalert.org